實(shí)現(xiàn)ATP熒光檢測(cè)儀方法的三大要素
發(fā)布日期：2016-11-23點(diǎn)擊次數(shù)：2982
ATP熒光檢測(cè)法能在十幾秒內(nèi)實(shí)現(xiàn)檢測(cè)，它大大提升了傳統(tǒng)細(xì)菌培養(yǎng)法24-48小時(shí)的工作效率，ATP方法的實(shí)現(xiàn)包括儀器、試劑和如何使用三大要素。
1、儀器
當(dāng)儀器和試劑配合使用，整體靈敏度達(dá)到10-15～10-18摩爾ATP范圍時(shí)，可以用于食品表明微生物檢測(cè)、手衛(wèi)生檢測(cè)、餐飲器具潔凈度檢測(cè)、重點(diǎn)科室和重要活動(dòng)場(chǎng)所（如奧運(yùn)會(huì)、世博會(huì)、人大政協(xié)會(huì)議等）物表檢測(cè)和衛(wèi)生安保、食品加工器具、工作臺(tái)等關(guān)鍵控制點(diǎn)消毒結(jié)果檢測(cè)、醫(yī)療環(huán)境工作平臺(tái)（器械表面、內(nèi)窺鏡、空調(diào)進(jìn)出氣口）衛(wèi)生學(xué)即時(shí)評(píng)估，其實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)能有效配合HACCP或GMP體系管理的要求；當(dāng)儀器和試劑配合使用，整體靈敏度達(dá)到10-17-10-19摩爾ATP范圍時(shí)，可用于更高要求的檢測(cè)如復(fù)用醫(yī)療器械清洗效果后評(píng)估和二次清潔處理評(píng)價(jià)、醫(yī)療用水檢測(cè)等。當(dāng)然目前國(guó)外ATP設(shè)備和試劑的研發(fā)已經(jīng)向更高目標(biāo)——可檢測(cè)到10-15～10-18摩爾水平的ATP努力，檢測(cè)試劑也可達(dá)到5個(gè)細(xì)菌細(xì)胞的水平。
2、如何使用、取樣
這是影響性和一致性的關(guān)鍵之一，可按照<<醫(yī)院消毒衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)附錄A（規(guī)范性附錄）采樣及檢查方法>>等規(guī)范要求再參照生物手持式ATP生物熒光檢測(cè)儀使用說(shuō)明書采樣、檢測(cè)、計(jì)算得出結(jié)果并記錄報(bào)告。采樣：（面積類）將ATP拭子采樣棒一支在物體表面或雙手指曲面從指跟到指端來(lái)回涂擦個(gè)兩次（一只手涂擦面積約30cm2），并隨之轉(zhuǎn)動(dòng)采樣拭子。（體積類）將ATP拭子采樣棒一支在待測(cè)液體充分浸濕。檢測(cè)：將拭子放入手持ATP儀，獲得被測(cè)樣本與細(xì)菌污染程度相對(duì)應(yīng)的ATP生物熒光值，得出菌落數(shù)指標(biāo)（詳見下文操作步驟及定標(biāo)評(píng)價(jià)）。另外天隆牌ATP儀自帶的 軟件能自動(dòng)將ATP熒光值儲(chǔ)存、處理和傳輸。
3、結(jié)果判讀
以上取樣、檢測(cè)全過(guò)程在1分鐘之內(nèi)快速完成，比起24-48小時(shí)的傳統(tǒng)細(xì)菌培養(yǎng)優(yōu)勢(shì)巨大。細(xì)菌數(shù)量與細(xì)菌內(nèi)所含ATP量有明確的相關(guān)性，通過(guò)檢測(cè)ATP含量可間接得出細(xì)菌數(shù)量，即ATP熒光檢測(cè)儀檢測(cè)結(jié)果顯示的發(fā)光值——相對(duì)照度單位RLU讀數(shù)與常規(guī)細(xì)菌培養(yǎng)法結(jié)果菌落數(shù)CFU具有很高的相關(guān)性，兩者沒有統(tǒng)計(jì)上的顯著差異，因此這也是ATP熒光法細(xì)菌檢測(cè)的理論基礎(chǔ)。
ATP生物熒光檢測(cè)儀利用生物化學(xué)發(fā)光技術(shù)將不可見的ATP濃度變?yōu)榭梢姽廨敵觯瑥亩远康慕Y(jié)果間接顯示微生物數(shù)量，數(shù)值位于0-9999之間，以相對(duì)光單位RLUs表示。1RLUs約等于1fmol的ATP。RLU讀數(shù)可以與用戶設(shè)定的限值范圍相比較，提供的檢測(cè)。